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Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制剂EO0381

简要描述:
Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制剂EO0381 EO0381 2500 u (40 u/?l) EO0382 4 x 2500 u (40 u/?l) EO0387 400 u (40 u/?l)

更新时间:2017-10-09

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厂商性质:代理商

生产地址:

 

Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制剂EO0381  的详细介绍

Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制剂EO0381
产品信息:

特点

 

  • 应用范围广,适合多种使用条件。
  • 保护RNA,使其免受降解。zui高有效温度达55°C。

应用

 

  • 抑制RNA降解,应用如下:
    一 体外转录(1);
    一 cDNA合成(2);
    一 体外翻译(3);
    一 分离含有mRNA-蛋白复合物的哺乳动物细胞组分(3);
    一 RNA扩增(4)。
  • RNA纯化和保存。
  • 分离和鉴定特殊的核酸酶活性(5)。
  • 肿瘤抑制研究(6)。

说明

Ribolock™ RNase Inhibitor按1:1比例非竞争性与RNases A(见图1)、B和C结合,从而抑制RNases A、B和C的活性。但是其不能抑制真核生物RNases T1、T2、U1、U2、CL3和原核生物RNases I和H的活性。

 

来源

大肠杆菌菌株,含有编码哺乳动物核酸酶抑制剂的克隆基因。

 

分子量

49.6 kDa,单体。

 

活性单位定义

1个活性单位是指50%抑制5? ng RNase A活性所需Ribolock™ RNase Inhibitor用量。

抑制剂活性分析混合物:100 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1.2 mM EDTA, 0.1 mg/ml BSA, 100 ng/ml RNase A, 0.1 mg/ml [3H]-RNA, 50 mg/ml酵母RNA, 8 mM DTT。

 

保存缓冲液

保存缓冲液组分:
20 mM HEPES-NaOH (pH 7.5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 0.5 mM ELUGENT变性剂和50% (v/v)甘油。

 

质量控制

相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、磷酸酶、核糖核酸酶污染。功能测试方法为RNA和cDNA的合成。

 

抑制与失活

  • 抑制剂:常用变性剂(SDS、尿素)和所有氧化剂(对-氯汞基苯甲酸盐、溶解氧、高氧化状态的离子)可强烈抑制RiboLock™ RNase Inhibitor并释放被结合的RNase。
  • 失活:75°C加热10分钟;70°C加热10 分钟仍然可检测到活性残留。

 

备注

  • 保存缓冲液中的DTT可确保Ribolock™ RNase Inhibitor长期保存的稳定性,其并非抑制剂活性发挥的必需品。
  • 推荐浓度 – 1 unit/μl/μlμl反应体系。


 
 

图1。Ribolock™ RNase Inhibitor对RNase A的抑制效果分析。
37°C时,人RNA (1? μg)中添加20 u Ribolock™ RNase Inhibitor和不同量的RNase A(不含DNase和蛋白酶,#EN0531)。
M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder
C1 – 人总RNA
C2 – 人总RNA,含RNase A
1-4 – 人总RNA,含RiboLock™ Ribonuclease Inhibitor和RNase A

 

图2。Ribolock™ RNase Inhibitor热稳定性。
人的总RNA (1? μg)中添加20 u Ribolock™ RNase Inhibitor和50 pg RNase A(不含DNase和蛋白酶,#EN0531),不同温度条件下孵育。
M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder
C1 – 人总RNA
C2 – 人总RNA,含RNase A
1-5 – 人总RNA,含RiboLock™ Ribonuclease Inhibitor和RNase A
 

 

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